康诺亚/Ouro OM336的临床前数据解读

我们之前报道过Ouro Medicines，这家公司曾经被Fierce Biotech列为2025年度Top之一，作为NewCo模式下的新兴Biotech，公司之前从康诺亚处获得了BCMAxCD3T细胞双抗CM336（OM336，gamgertamig），最近公司就在mAbs上发表了一篇关于OM336临床前数据的详细报道。

现有B细胞疗法的核心局限

B细胞成熟抗原（BCMA）属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族成员，其配体APRIL和BAFF通过激活NF-κB及PI3K信号通路维持浆细胞的存活。长期以来，BCMA被视为多发性骨髓瘤等浆细胞恶性肿瘤的理想靶点。然而，近年来的研究逐渐揭示，BCMA的表达并不仅限于终末分化的浆细胞，在记忆B细胞乃至部分CD19阳性的早期B细胞亚群中，同样存在低水平的BCMA表达。

尽管这些早期B细胞上的BCMA水平远低于浆细胞，常规流式细胞术难以检测，但高灵敏度的分析方法和临床实践表明，这一低水平的表达已足以被强效的BCMA靶向疗法所利用。

OM336就是在这个背景下被开发的，研究团队采用了“亲和力调节”的工程策略。该分子以人源化IgG4为骨架，采用“旋钮入孔”（knobs-into-holes）技术实现两条不同重链的异源二聚化，确保一个Fab臂结合BCMA、另一个Fab臂结合CD3ε。值得强调的是CD3结合臂经过特意的人源化和亲和力减弱处理，这使得其对人CD3ε/δ异二聚体的亲和力约为临床已获批的teclistamab类似物的三分之一。

通过生物层干涉技术（BLI）测定，OM336对BCMA的平衡解离常数（Kd）为0.65 nM，而对CD3的亲和力则显著降低，形成了超过50倍的BCMA-to-CD3亲和力偏向。这一设计哲学的核心在于：让抗体优先“抓住”表达BCMA的靶细胞，仅在靶细胞存在时才有效招募T细胞，从而最大限度地减少无抗原存在时的非特异性T细胞激活和细胞因子释放。

此外，OM336还引入了Fc沉默突变（L235E和P329A），在保留与新生儿Fc受体（FcRn）结合以延长血清半衰期的同时，消除了与Fcγ受体及补体的相互作用，降低了脱靶毒性风险。铰链区的S228P突变则进一步增强了分子的结构稳定性。

这也是为什么OM336的卖点之一是CRS发生率较低，更安全。

体外药效学和全B细胞谱系清除

研究者选用了一组BCMA表达密度跨度极大的B细胞系来系统验证OM336的效果，该B细胞系涵盖从高表达NCI-H929细胞（约25300个受体/细胞）到低表达Mino细胞（约1100个受体/细胞）。这一数量级的差异为评估TCE在不同抗原密度下的敏感性提供了严苛的模型。

实验结果显示，OM336能够在24至72小时的共培养中诱导BCMA依赖性的、强效的细胞裂解。值得注意的是，在低BCMA表达的Mino细胞中，尽管24小时时裂解效果有限，但72小时后裂解率超过了80%。48小时的半数有效浓度（EC50）在高表达和低表达细胞系中几乎相同（分别为0.10 nM和0.16 nM）。

这些数据表明，即使在抗原密度极低的条件下，OM336依然能够建立有效的免疫突触并介导强效杀伤，这一特性对于清除表面BCMA水平低至常规方法难以检测的早期B细胞亚群至关重要。

不过这项研究中最引人注目的是，是OM336对原代人外周血单个核细胞（PBMC）中几乎整个B细胞谱系的清除能力。尽管外周B细胞表面的BCMA表达量往往低于常规流式细胞术的检测下限，OM336仍能介导对总CD20阳性B细胞超过75%的剂量依赖性耗竭。进一步分析各B细胞亚群发现，naïve B细胞、未转换记忆B细胞、转换记忆B细胞均对OM336高度敏感；双阴性（CD27⁻IgD⁻）和过渡性（CD24hiCD38hi）B细胞的杀伤深度略低，但总体仍表现出广泛的谱系清除能力。这一“泛B细胞耗竭”（pan-B cell depletion）特征与近期临床报道中BCMA靶向TCE在自身免疫病患者中几乎完全清除外周CD19阳性B细胞的现象高度一致。

研究团队还设计了一项阻断实验，使用仅含BCMA结合臂、不含CD3结合臂的效应子无效型抗BCMA抗体预先与PBMC孵育，能够显著抑制OM336介导的B细胞杀伤；而抗CD19对照抗体则无此效应。这一结果强有力地证明，即便是表面BCMA表达较低的原代B细胞，其杀伤依然是通过BCMA依赖机制实现的，微量的BCMA表达足以在生理效应靶比（E:T ratio）下触发T细胞介导的细胞毒性。

在与Teclistamab类似物的头对头比较中，两种分子在最大细胞裂解效果上相当，但OM336在IFNγ和IL-6等炎症细胞因子的诱导水平上呈现数值上更低的趋势。

跨疾病研究和动物体内验证

为了评估疾病相关生理改变是否会影响治疗效果，研究纳入了来自16名供者的PBMC样本，涵盖健康对照、类风湿关节炎（RA）、系统性红斑狼疮（SLE）、免疫性血小板减少症（ITP）、干燥综合征（SjD）及多发性骨髓瘤（MM）患者。

各疾病组的基线T:B细胞比例差异显著。骨髓瘤样本的效应靶比普遍较高，而健康供者和SLE样本则较低。然而，OM336在所有疾病组中均表现出一致且强效的CD20阳性B细胞耗竭，EC50值稳定在2-5 nM之间，且与基线E:T比无显著相关性。这意味着即使在淋巴细胞减少或T细胞密度较低的组织微环境中，OM336仍能维持其杀伤效力。

在细胞因子诱导方面，各疾病组与健康对照之间未观察到显著差异。除ITP患者组中IFN-γ水平呈现数值上的升高趋势（但未达统计学显著）外，其余各组间的炎症因子释放谱高度一致。这一发现支持将健康供体数据作为预测更广泛患者群体基线炎症潜力的可靠替代指标。从B细胞亚群分析来看，所有疾病组中绝大多数亚群的耗竭率均超过80%，未出现特定疾病状态下某亚群对OM336产生独特耐药性的证据。

在NCI-H929和MM.1S两种人PBMC重建的B-NDG小鼠异种移植模型中，OM336展现了剂量依赖性的抗肿瘤活性。在NCI-H929高BCMA表达模型中，1 mg/kg剂量组的平均肿瘤抑制率（TIR）高达95%，6/10的动物出现肿瘤退缩至起始体积以下的现象；在MM.1S中等表达模型中，3 mg/kg剂量组的TIR达到80%。整个实验期间，OM336治疗组未出现显著体重下降，显示出良好的耐受性。

非人灵长类（恒河猴）研究则进一步验证了OM336的药代动力学（PK）和药效学（PD）特征。由于人IgG4与恒河猴FcRn具有强结合能力，OM336表现出超过5天（140-185小时）的血清半衰期，在所有剂量组中均可检测至给药后39-60天。

在重复给药研究中，外周B细胞计数在首次给药后急剧下降，至第14天降至100个/微升以下，并持续抑制至第43天（停药后数周）。骨髓涂片分析显示，各剂量组在给药后第30天和第58天均表现出骨髓浆细胞比例的显著降低。值得注意的是，在低剂量组（0.5 mg/kg）中，这些效应在无明显体重下降或全身毒性的情况下实现，且B细胞和浆细胞在停药后呈现可逆性恢复趋势。

总结

总体而言，这次详尽的临床前数据对目前已经在进行的临床转化起到了支持作用，另外由于OM336选择在自身免疫性溶血性贫血，免疫性血小板减少症，大疱性类天疱疮，寻常型天疱疮等竞争压力小的自免适应症中开展临床，这样的战略不必陷入多发性骨髓瘤的大内卷中，可以期待未来的临床转化